膜蛋白作為復(fù)雜性功能蛋白，在物質(zhì)運(yùn)輸、信號(hào)傳導(dǎo)、能量轉(zhuǎn)換及細(xì)胞增殖分化中發(fā)揮著重要作用，基于上述膜蛋白在細(xì)胞中的各種功能，膜蛋白一直是各研究方向的熱點(diǎn)。

目前，在藥物研發(fā)中，一半以上的藥物靶點(diǎn)都是膜蛋白。但是由于膜蛋白結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，在研究中的重組表達(dá)上一直是一個(gè)難點(diǎn)，而具體多種原因包括以下幾點(diǎn)：

膜蛋白定位：膜蛋白功能的正確行使，和其正確定位有著必要的關(guān)系，但是要保證膜蛋白的天然構(gòu)象及正確的靶向和插入細(xì)胞膜是具有很大的難度；

跨膜蛋白疏水性：因?yàn)榭缒さ鞍拙哂惺杷畢^(qū)域，是它們能夠穩(wěn)定的嵌入細(xì)胞膜中，所以水環(huán)境中的蛋白表達(dá)出現(xiàn)錯(cuò)誤折疊或聚集沉淀的問(wèn)題；

蛋白質(zhì)毒性：在跨膜蛋白大量表達(dá)時(shí)，因疏水區(qū)域問(wèn)題，可能會(huì)出現(xiàn)大量錯(cuò)誤折疊或未折疊的蛋白，而這些蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的積累會(huì)激活細(xì)胞應(yīng)急反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡；

天然表達(dá)水平低：某些膜蛋白在天然表達(dá)水平上非常低，所以后續(xù)的純化和檢測(cè)難度較大，重復(fù)困難，增加時(shí)間成本。

案例一

案例二

無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)技術(shù)可以很好的解決上述中膜蛋白表達(dá)的問(wèn)題，此技術(shù)是在體外實(shí)現(xiàn)DNA到蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄翻譯過(guò)程，反應(yīng)體系中包括轉(zhuǎn)錄翻譯所必需的元件、物質(zhì)和能量，并且我們會(huì)根據(jù)不同蛋白質(zhì)特點(diǎn)構(gòu)建不同的體外反應(yīng)體系，確保目的蛋白的正確表達(dá)與折疊。如上圖所示，在我們的預(yù)實(shí)驗(yàn)中，四次跨膜蛋白及七次跨膜蛋白使用無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)體系表達(dá)，加入特殊配置的輔助分子試劑后，在上清液中得到了可溶性的目的蛋白，且產(chǎn)量水平清晰可見(jiàn)。

所以，我們相信無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)技術(shù)能夠助您在蛋白表達(dá)研究中更高效快捷。